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中瑞祥自动薄层色谱成像分析系统薄层色谱成像仪工作原理
浏览次数:11发布日期:2026/2/26
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中瑞祥自动薄层色谱成像分析系统薄层色谱成像仪工作原理

是一种将薄层色谱分离技术与现代数字成像技术相结合的仪器,用于对样品中的组分进行定性、定量分析和可视化成像。其核心原理是利用不同物质在固定相(薄层板)与流动相(展开剂)之间的分配系数差异实现分离,再通过光学检测系统捕捉斑点图像,实现高精度、高灵敏度的分析。

工作原理

薄层色谱成像仪的操作与分析基于以下三个核心环节:

分离原理

样品点样于涂有吸附剂(如硅胶)的薄层板上,将薄层板置于密闭的展开槽中,展开剂通过毛细作用沿板面移动。样品中各组分因与吸附剂的吸附能力及在展开剂中的溶解度不同,移动速度各异,从而在板上形成分离的斑点。

 

检测与成像原理

分离完成后,薄层板被置于成像仪中,通过不同波长的光源激发斑点,由高分辨率相机捕获图像:

紫外/可见光检测:某些化合物(如含共轭双键或芳香环结构)会吸收紫外光(如254 nm365 nm),在图像中呈现为暗斑;白光(400–700 nm)则用于观察样品的自然颜色或显色后的斑点。

荧光检测:具有荧光特性的化合物(如某些生物碱、维生素)在紫外光激发下会发射可见荧光,形成明亮斑点;也可通过化学衍生化引入荧光基团以增强检测灵敏度。

化学发光检测:部分仪器支持化学发光反应,通过酶促或化学反应产生光信号进行检测,适用于痕量物质分析。

图像处理与分析

成像系统(如CCDCMOS相机)将光信号转化为数字图像,配合专用软件进行:

斑点识别与定位:自动识别斑点位置,计算比移值(Rf值)用于定性分析。

定量分析:通过斑点的光强度(吸光度或荧光强度)与标准品对比,实现含量测定。

图像增强:调整对比度、亮度、去噪、融合多幅图像,提升模糊斑点的清晰度。

数据管理:支持电子签名、审计追踪、多级权限管理,符合GLP/GMP规范。

操作流程

样品制备与点样

将样品溶解于合适溶剂中,用毛细管点样于薄层板起点线(距底边约1–2 cm),点样直径控制在1–2 mm,避免过量导致拖尾。

展开

将点样后的薄层板放入预先饱和的展开槽中,展开剂液面低于点样线(通常0.5–1.0 cm),密封槽盖,待展开剂前沿上升至距顶端1 cm时取出,晾干。

显色(如需)

根据样品性质选择显色方式:

紫外灯下直接观察:适用于具有紫外吸收或荧光特性的物质。

化学显色:喷洒显色剂(如硫酸乙醇、碘蒸气)后加热显色。

无需显色:直接成像,避免化学试剂干扰定量结果。

成像分析

将薄层板放入成像仪,设置检测波长(如254 nm365 nm、白光)、曝光时间(0–10 s)、分辨率(20–200 μm/像素)等参数,启动扫描。仪器自动采集图像并保存。

数据分析

使用配套软件进行斑点标注、Rf值计算、峰面积积分、与标准品比对,生成报告。部系统支持指纹图谱分析、多板平行比对、数据备份与审计追踪。

关键优势

高灵敏度:可检测微克(μg)甚至纳克(ng)级样品。

非破坏性:成像后样品可回收,便于后续分析。

高通量:支持多板同时成像,适合中药指纹图谱、药物质量控制等场景。

标准化:软件自动化控制减少人为误差,符合药典要求。

该技术广泛应用于药品鉴别、杂质检查、中药质量控制、环境监测和食品分析等领域,是现代实验室的分析工具